定做营养琼脂培养基配制操作要点及常见注意哪些方面
日期:2021-10-25 | 中海生物技术文库 | 浏览:2154 次
简单讲述琼脂概念:
琼脂(Agar)是一类从植物中提炼的多糖,主要是来自于海藻植物。在微生物培养基中,琼脂通常只是用来作为凝固剂使用。液体培养基中琼脂的增加量一般来说为0.5至2克/升,使中.海培养基有着一定的粘稠度,避免液体相互对流,经常使用于厌氧培养。半固体培养基中琼脂增加量为三点五至四克/升,经常使用于菌种保藏和动态性检验检测。固体培养基中琼脂的添加量为十二至十五克/升。植物组织培养基中琼脂增加量为五至十克/升。
一般来说,琼脂粉为白色、浅黄色或浅灰色粉末,不溶解于冷水。只有在加温烧开或高压灭菌能够使琼脂充分均匀溶解。绝大多数琼脂的熔点在九十摄氏度上下,冷却后后能够凝结成固态。大部分琼脂的冰点在四十摄氏度上下。尽管重复加温和冷却后能够使琼脂频繁在液态和固态两者之间发生变化,同时琼脂的凝胶强度会随着反复的次数愈来愈低。
配制营养琼脂培养基操作要点
①通过营养培养基标签贴称加入适量培养基粉剂溶解于纯净水,加温烧开至琼脂全部充分均匀溶解,装进试管或锥形瓶中;
②在标准规定的环境下对分装的培养基实行高压蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌后的培养基能够重复烧开四至六次,直到培养基结束了。全部充分均匀溶解后,倒进盘里,制作而成平板安全使用;
③高压蒸汽灭菌后,待中'海培养基冷却后至五十摄氏度上下后,可放置在四十七至五十摄氏度的水浴中保温。水浴工作温度可通过培养基具体凝结工作温度适当提升 ,置放时长一般来说不超过四个钟头。
④琼脂培养基操作使用前,添加一定的添加剂物质,混匀倒进平板里,凝结储备用;或是制作成斜面倾注使用等。联系中海生物www.zhzbio.com琼脂培养基定制咨询
营养琼脂培养基配制常见注意哪些方面
①充分均匀溶解粉剂时,提议水的温度在四十摄氏度以内,不超过六十摄氏度。琼脂曝露在开水中,其外层非常容易吸水发硬,生成硬结,并不有利于分散化和充分均匀溶解。所以,在充分均匀溶解粉剂时,以凉水为宜,并始终保持搅拌至分散化均匀无结团,再实行加温正确处理;
②高压蒸汽灭菌前需将琼脂加温烧开至全部充分均匀溶解分散化均匀,才能分装试管或锥形瓶;要不然,分装后应该发生琼脂分散不均匀、凝固性不一样的具体情况;高压蒸汽灭菌前加温、烧开、充分均匀溶解有利于促进加速高压灭菌环节中的热量渗透性,提升高压蒸汽灭菌实际效果,减少高压蒸汽灭菌不成功的几率。
③凝固营养琼脂培养基不可以再一次高温高压灭菌。假如中海培养基中的物质比较稳定,它们能够再一次充分均匀溶解在开水浴中。
④需用增加抗生素或别的不稳定物质的培养基,在安全使用前要在培养基冷却后至五十至五十五摄氏度时增加,这样的物质在过早或过热时增加,非常容易造成不稳定因素。不利于不稳定物质溶解,从而减少培养基安全使用实际效果;
⑤凝结后的培养基不可频繁加温溶解处理。重复加温非常容易溶解培养基中的营养元素,琼脂的凝胶强度会减少。通常物质比较稳定的培养基能够充分均匀溶解一次性使用。
⑥凝结的琼脂培养基不可存放在冷藏环境下。中 海培养基的冷藏会严重破坏琼脂的内部构造,造成失去水分或凝固性差,琼脂特性也发生了变化。
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