做ELISA试验为何失败不成功的关键要点解析
日期:2021-10-08 | 中海生物技术文库 | 浏览:1098 次
在ELISA试验测定方法中有不少因素影响,其实际操作流程还是要遵循相应的技术规范和要求。除正常反应之外,中海在检查核验中还常常见到出现假阳性或假阴性结果问题。以下是中海生物技术总结解析做ELISA实验失败zhzbio.comELISA试验不成功的四个关键要点:
ELISA实验失败关键要点❶标本自身的影响:
溶血标本和混有红细胞的血清经ELISA法试验检测易产生假阳性。可能是红细胞中的血红素或溶血血清中包含过氧化物酶的红蛋清,在清洗过程中通常不容易完全洗干净。它能使过氧化氢释放原始氧,从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性有色物质,即变成蓝色,产生假阳性。造成严重溶血标本禁用。
ELISA试验不成功关键要点❷标本被细菌病毒感染:
因为细菌病毒或许包含内源性辣根过氧化物酶,被真菌感染的样品与溶血样品一致,或许产生非特异性显色,势必会影响ELISA实验测定方法最终结果。
ELISA实验失败关键要点❸标本储藏保管不合理:
标本在冰箱中放置时长太久,会造成间接ELISA测定本底过深,产生假阳性。为了更好地克服上述影响,ELISA试剂盒测定方法的血清样品应新鲜采集。如无法马上测定方法,可将五日内测定方法的血清样品储存在四摄氏度,七天过后测定方法的血清样品应较低温度冷藏。冷冻储藏和解除冻结的标本,造成鸡蛋白质部分集中化,不均匀分布,应充分融合后进行测量。此时应当轻轻地融合,无需明显振荡。
ELISA试验不成功关键要点❹标本凝结并不充分:
日常工作,偶而为了更好地赢得快速检测的时长,通常在血液进行凝结前,利用强制离心分离血清,使一部分纤维蛋白原残留在血清中,中海ELISA测定方法时可产生看得见的纤维蛋白块,易于产生假阳性最终结果。于是采集后应当使血样充分凝结,接着进行血清分离。
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