ELISA实验中两种洗板方法介绍

中海生物在ELISA实验操作中，洗板有手动洗板和洗板机洗板两种方法，两者没有本质区别。只需操作符合规范标准，就可获得准确可靠的实验结论。

 手动洗板是指在每次反应温育后，将反应溶液吸出或干燥，然后用洗涤液填充板孔。静置两三分钟后，将洗涤液吸出或晾干，然后在吸水纸上拍干。重复上述洗涤步骤三四次，最后在吸水纸上拍干。人工洗板人为因素大，实验者必须经验丰富，洗的次数要足够，冲击力不能太大。洗涤液的加入量应限制在刚好充满反应孔，以防止孔开口处的游离酶被洗去，同时防止液体在孔间交叉。洗完后扣干也很重要，否则容易造成假阳性。每次洗完板后，用吸水纸轻轻拍干，垂直做决定，避免交叉感染。不要用力过猛，防止抗原抗体复合物分离；吸水纸应该是一次性的，使用不易脱落碎屑的吸水纸为宜。酶缀合物不耐干燥，尤其是在较高温度下，因此更容易失活。所以应尽可能缩短干燥后的反应板在空气中的暴露时间。时间越长，吸光度值越低。

  洗板机是将人工操作变成洗板机工作，人为因素少/速度快/条件恒定。但是用洗板机洗板有一个特点就是每次洗板后都干不了，所以液体残留比较多，需要增加洗板次数来减少这个物种误差。洗板机洗板次数越少，假阳性率越高。本次实验，洗一次板，假阳性率高达90%。洗板两次后，假阳性率为38%。洗板三次假阳性率为2。洗板四五次，未发现假阳性。盘子洗的次数越多越好。次数太多不仅浪费人力物力，还会导致假阴性结果。所以一般试剂盒要求洗板四五次。洗板时，洗衣机要经常检查洗头是否通畅。如果被杂物堵塞，可以用注射器针头挑出来。为了达到更好的洗涤效果，实验室可以采用机洗和手工洗涤相结合的方法。机洗后进行一两次手动洗板，可达到理想的洗板效果。

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