酶联免疫吸附(ELISA)测定实验组织样本制备处置办法
日期:2022-01-19 | 中海生物技术文库 | 浏览:1090 次
以便切实保障ELISA实验报告的准确性,在收集整理样本前务必有完善的计划方案。中海生物觉得新鲜样本应及早检查测验,收集整理后七天内检查测验的样本应在四度环境储藏预留。如果有较为特殊缘由应该定期进行收集整理样本,告知样本按时封装,并在零下二十度至零下八十度储藏。主要是因为冷藏柜与室内温度存有相应的温度差,蛋白质更易生物降解,同时影响到科学试验品质,于是应防止重复融冻。请结合自身的实际情况正确处理各种不同的酶联免疫吸附(ELISA)测定实验中血清/血浆/尿液/细胞培养上清/组织样本制备处置办法。
㈠血清:室内温度下的血液自然而然凝结十至二十每分钟,以每分钟两三千转离心二十分钟左右。谨慎收集整理上清液,假如储藏环节中发生沉淀物,需重新离心。
㈡血浆:抗凝剂应结合样本标准要求选取乙二胺四乙酸或柠檬酸钠。以每分钟两三千转离心混和十至二十每分钟后,谨慎收集整理上清液,假如在储藏环节中生成沉淀物,重新离心操作。
㈢尿液:用没有细菌试管收集整理,以每分钟两三千转离心二十分钟左右。谨慎收集整理上清液,假如在储藏环节中生成沉淀物,重新离心。
㈣细胞培养上清:检查测验分泌成份时,用没有细菌管收集整理。中海核查测验细胞内成份时,细胞悬液用PH7.2~7.4的PBS缓冲液稀释,细胞浓度值实现一百万/毫升左右。重复融冻会损伤细胞,释放出来细胞内成份。以每分钟两三千转离心二十分钟左右。谨慎收集整理上清液。假如在储藏环节中生成沉淀物,应重新离心。
㈤组织样本:切好样本后称重,添加足量PH7.2~7.4的PBS缓冲液,用液氮冷冻储藏预留。样本溶化后维持在二至八度。添加足量PH7.2~7.4的PBS缓冲液,用手或匀化器完全匀化样本。其中一部分包装检测,剩余的冷藏预留。
结合有关资料,样本收集整理后应及早提炼,提炼后应及早开展科学试验。中海生物技术假如不能马上开展试验检测,可将样本储藏在零下二十度,但应防止重复融冻。含叠氮化钠的样本不能检查测验,由于叠氮化钠抑制辣根过氧化物酶的活力。
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