伊红美蓝琼脂培养基EMB原理配方用途方法

㈠伊红美蓝琼脂培养基原理:

伊红美蓝琼脂培养基算是弱选择性培养基，英文简称EMB培养基，通常用于分离鉴别肠道致病菌，尤其是大肠菌群和粪大肠菌群。蛋白胨供应碳源\氮源\维生素\生长因子等营养物质；乳糖是由大肠杆菌发酵的碳水化合物；磷酸氢二钾是培养基pH缓冲剂；琼脂是培养基的凝固剂；伊红又称曙红或四溴荧光素，为酸性染料，美蓝又称亚甲蓝，为碱性染料。它们都被用作培养基中的鉴别指示剂，以抑制革兰氏阳性菌的生长。

大肠杆菌分解乳糖产酸时，细菌带正电，因此被染成红色，再与美蓝结合，产生紫黑色菌落，有金属光泽；产气肠杆菌呈褐色，几乎没有金属光泽。乳糖分解菌/沙门氏菌和志贺氏菌为乳糖发酵微生物，产生无色/透明或琥珀色菌落；凝固酶阳性葡萄球菌是具有无色针尖的菌落；白色念珠菌是蜘蛛丝或羽毛菌落。不致病/乳酸不发酵的革兰氏阴性菌也会在培养基上生长，需要通过其他的生化试验来分辨。

㈡伊红美蓝琼脂培养基EMB配方：

㈢伊红美蓝琼脂培养基用途方法:

称取中海伊红美蓝琼脂培养基干粉37.4g克，添加1.0升蒸馏水或去离子水，搅拌加热煮沸至完全溶解，在一百二十一度高压灭菌十五分钟后备用。

使用中海生物伊红美蓝培养基鉴定水中大肠杆菌，具体操作流程如下所述:

⒈制作伊红美蓝培养基，趁热注入培养皿，浓缩成平板备用。

⒉取河水或沟水于高温灭菌锥形瓶中，以1比10稀释。

⒊在伊红美蓝培养基上接种0.1毫升稀释液。用划线平板法分离。

⒋将划线培养皿倒置，三十七度放置十八至二十四小时。培养基中会出现大肠杆菌菌落，深蓝色黑色点有金属光泽或无光泽。

⒌将菌落接种在斜面培养基上，由营养琼脂培养基制作而成。

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