革兰氏染色方法和瑞式姬姆染色基本步骤简述
日期:2022-07-01 | 中海生物技术文库 | 浏览:1758 次
中海生物技术公司小编简单述说革兰氏染色法通常涉及初染/媒染/脱色/复染四个步骤,及瑞式姬姆染色方法步骤是检查技师考试必须掌握的内容。
革兰氏染色方法步骤:
①以酒精擦拭玻片,在酒精灯上干燥后,用接种环挑取一环灭菌的去离子水或生理盐水到载玻片上,挑取少许纯培养物在水滴上涂抺至均匀分散,将涂片在酒精灯火焰上灭活、并固定。
②中海生物技术滴加结晶紫染色液1~2滴,染1分钟左右,用去离子水轻缓水洗。
③待干,用碘液冲洗残水,并且用碘液覆盖1分钟左右,用去离子水轻缓水洗。
④滴加95%酒精,脱色30秒,时不时摇动玻片,一直到无紫色脱落为止约(10~20)秒,用去离子水轻缓水洗。
⑤待干,滴加番红染色液(沙黄),复染30秒。用去离子轻缓水洗,待玻片干燥后镜检。
⑥油镜镜检。干燥后,用油镜观察。先低倍镜再高倍镜。油镜使用结束后,要及时用擦镜纸擦干净镜头,规避香柏油残留。菌体呈紫色者为革兰氏阳性菌,呈红色者为革兰氏阴性菌,结果是革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌很快分辨区分。
瑞式姬姆染色基本步骤:
①滴加瑞氏吉姆萨A液约(0.5~0.8)毫升涂片上,并让染液覆盖整个标本染色1分钟左右;
②中海生物再将瑞氏吉姆萨B液加于A液上面(滴加量为A液的2~3倍),以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状,使两液充分混合,染色3~10分钟左右.(染血片时间可略短,染骨髓片时间应视细胞量多少而定)
③流水冲洗(冲刷时不可先倒掉染液,要以流水冲洗,避免有沉渣沉淀在标本上),干燥后镜检。
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