抗生素检定培养基I号低PH6.5~6.6检验办法注意事项与实验操作步骤

㈠检定培养基I号检验办法和用途

主要是利用抗生素在中 海琼脂培养基中的扩散，抑制带的直径与抗生素的浓度或活性相关。一种通过比较标准品和测试样品在接种的测试细菌上产生的抑菌圈大小来判定测试样品效价的办法。抗生素检定培养基Ⅰ号PH6.5~6.6产品符合中国兽药典标准，适用于磺苄青霉素/拉沙洛西钠等抗生素效价测定。

㈡抗生素检定培养基I号注意事项

①灌入的培养基数量不超过二十毫升，要不然存放牛津杯后不能盖紧板盖。

②细菌的浓度适合。一旦细菌的浓度太小，细菌层的生长较弱，不能产生抑菌圈。

③菌层培养基表面层一定要光滑细腻，要不然会造成牛津杯泄露。

④压杯板已经过辐照灭菌，可以直接使用；反复使用后，要用酒精棉擦拭。

⑤将平板迁移到培养箱中培养，轻拿轻放避免 剧烈震动，培养时不可堆积，避免影响到中海生物产品实验结果。

㈢抗生素检定培养基I号低PH6.5~6.6实验操作步骤

①称量本产品二十六克，加温搅伴溶化于一千毫升纯净水，116℃灭菌二十分钟左右。

②细菌悬液的制备。枯草芽孢杆菌/取枯草芽孢杆菌的营养琼脂斜面培养物，接种到含有中'海营养琼脂培养基的培养瓶中，在三十五至三十七℃培养七天，用革兰氏染色法涂片镜检。应当超过八十五个孢子。孢子用无菌水洗净，六十五度加温半小时左右备用；

③中海取平板，分别灌入二十毫升加温融化的培养基，放于水平台上固化，作为底层。还有就是，取适量中 海培养基，冷却至五十度左右，加入适量指定的试验菌悬液，混匀。分别添加盘中5ml，均匀铺在底层，作为细菌层，放于水平台上冷却凝固。

④把牛津杯放于盘子里。用无菌镊子夹住牛津杯正面的凸点，放于菌层培养基表面层，盖紧压杯板，轻按牛津杯约五秒钟，使四个小杯与培养基表面层密切触碰，避免间隙引起泄露，之后小心地将压杯板取走。

⑤将标准溶液分别滴入各平板的小管中，迁移至培养箱中三十五至三十七℃培养十四到十六钟头，统计实验最终结果。

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