中海微生物菌种保存办法和活化次序操作

将贮藏好的微生物菌种放入合适的培养基中进行培养叫做菌种活化。想获得有足够接种次数的有活力的培养，就需要渐渐扩展增大培养更纯更好的培养物，中海微生物菌种的发酵通常需要两三代复壮过程，贮藏时的条件往往与培养时的条件不同，因此必须进行活化操作，让微生物菌种逐渐适应培养环境。

要了解微生物菌种活化次序，需要微生物菌株保存的方法。目前中海生物沿用液氮超低温冻结法和80℃冰箱冻结法/常规定期移植法/液体石蜡法/沙土管法/真空冷冻干燥法/等国内外常用的菌种保存方法，不同的微生物菌种保存办法zhzbio.com微生物菌种活化次序也不相同：

⑴液氮超低温冷冻法类似于-80℃冰箱冷冻法。安瓿管或塑料冷冻管从医用冰箱中取出，马上置于38℃-40℃水温活化并适当摇晃大约50秒到100秒，直到内部的冰完全溶化后打开塑料冷冻管和安瓿管，中 海把内容物转移到合适的培养基上进行培养。

⑵常规定期移植法的菌种活化非常容易，直接移植即可；

⑶活化保存在液体石蜡中的菌种时，选择少量菌种并将它们转移到合适的新鲜培养基中，生长繁殖后再转接。

⑷沙土管法保存菌种活化时，应在无菌环境下打开沙土管，取一些沙子放在合适的斜面培养基上，待细菌繁殖生长后再转接，把沙子和土壤颗粒放在合适的中.海液体培养基中，增殖培养后转接到斜面上。

⑸真空冷冻干燥法保存菌种活化时，先用70%酒精棉擦拭安瓿上部，加热安瓿管顶部，将无菌棉签浸入冷水中，擦拭一圈顶部，顶部出现裂纹，敲击用刀或镊子夹住颈部，敲掉破裂的安瓿管顶部，中'海用无菌水或培养液溶解菌种，用无菌吸管转移到新鲜培养基中进行中温培养；

根据以上微生物菌种保存办法，中海总结将微生物菌种从保存状态活化四个次序操作：

①制备适合菌株生长的中海培养基。

②将菌株从保存状态恢复到室温状态，如解冻冷冻菌株。

③将保存好的菌种通过操作接种到培养基中，此步骤称为菌种复壮。

④中海选择培养基上复壮的菌落，筛选部分菌落接种新的培养基，重复此步骤两叁次，即可长出更好的菌落。

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