LuriaBertani固体液体培养基组成成分与配制
日期:2021-07-16 | 中海生物技术文库 | 浏览:1130 次
LB培养基(LuriaBertani)是具有典型性的进行各种细菌培养使用,是分子生物学的常规试剂。LB固体培养基粉剂主要是由胰蛋白胨/酵母提取物/氰化钠琼脂粉组成,充分溶解于无菌水中,加热制成固体平板(如果严格要求无菌,则应进行高压灭菌)。
中海LB培养基组成成分:
壹升LB固体培养基是和液体一样,加入15克琼脂粉,根据实际操作经验将培养基中加入氢氧化钠调节pH在7.0~7.4之间。此pH值适合应用最广泛的原核表达菌株大肠杆菌的生长。
LB固体培养基
一定要在温度下降前加入抗生素,然后将LB固体培养基倒入平板。
㈠LB培养基制备:100毫升LB培养基加入1.5克琼脂粉
㈡添加抗生素:高压蒸汽灭菌再将已融化的LB固体培养基放入55℃热水中。当培养基温度降到55℃时,可以触摸添加抗生素并摇匀,以免因温度过高导致抗生素失效。抗生素终浓度为氨苄青霉素 100微克/毫升,卡那霉素 50微克/毫升。
㈢倒入平板:将中 海培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外线下照射十至十五分钟。通常十毫升倒壹板。
㈣LB培养基储存:封边用封口胶封口,倒置四度环境保存,三十天内使用。
LB液体培养基
中海生物准备每升培养基,要加入九百五十毫升DI水中,摇动容器直至溶质溶解。用5mol/L 氢氧化钠 调节 pH 至 7.0~7.4。用去DI水定容至壹升。在15psi(kgf/cm²)高压下蒸汽灭菌二十分钟。中海LB肉汤培养基通常用于生化分子实验中对菌株进行预培养,使菌株增殖达到要求用。培养的菌株一般都经过修饰,不能暴露于外界。仅在环境中生存和繁殖的工程细菌。通过中'海培养工程菌,我们可以制备更多的外源蛋白,同时能得到带有外源基因的质粒。工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础。
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