生物缓冲液(PBS、HEPES)优缺点对比
日期:2022-06-10 | 中海生物技术文库 | 浏览:1712 次
生物缓冲液能有效稳定水溶液的pH值,所以被大量应用于生物实验中。殊不知,以往常用的传统缓冲液,如碳酸盐缓冲液和磷酸盐缓冲液,不适用来某些生物实验中。这些试剂在pH7.5以上不能有效缓冲,会形成某些干扰反应。所以,1966年NormanGood博士等人提出了一系列两性离子缓冲液,可以解决传统缓冲液的局限性。这些缓冲液的pKa值等于或接近生理pH值,对细胞无毒,不会被细胞膜吸收。在此中海生物技术小编简述一下经常使用的PBS缓冲剂和HEPES生物缓冲液优缺点。
生物缓冲液(PBS、HEPES)优缺点对比
PBS | HEPES | |
有效的pH范围 | 5.8-8.0 | 6.8-8.2 |
生物毒性 | 不具生物毒性 | |
渗透压 | 具备等渗透压的特性,可防止细胞破裂。 | 使用 0.1 M HEPES 显著提高了培养基的渗透压。 |
细胞活力 | PBS 稀释的细胞培养样品可能会无意中降低细胞活力。 | HEPES 缓冲系统中可以看到更高的最大细胞密度和活力。 |
与金属离子的关系 | 与部分金属离子结合会产生络合物或沉淀。 | 可以忽略不计的金属离子产生络合物或沉淀。 |
与酶促反应的关系 | 可能会抑制酶促反应 | 适合用于酶促反应 |
HClO荧光检测 | 适用 | 不适用 |
在冷冻情况下的变化 | PBS 溶液的冷冻导致显著的 pH 变化。 | HEPES 溶液的冷冻不会导致 pH 变化。 |
用于电子显微镜研究的前缀固定剂 | 由于磷酸盐与二价阳离子有关。较高浓度的PBS会导致严重沉淀,从而阻止细胞有效过滤到过滤器上使用 | Hepes 代替 PBS 避免了这种沉淀 |
用于层析法 | 于层析法中适用 | |
高压灭菌 | 可以高压灭菌 | 不可以高压灭菌 |
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