马铃薯葡萄糖琼脂(Pda)培养基配方制备方法操作步骤与注意事项

中海生物PDA培养基全称为马铃薯葡萄糖琼脂培养基，其主要供霉菌和酵母菌计数及分离培育(GB4789.15-2010和ISO标准)。它用来各类大大小小的微生物检测实验操作。

马铃薯葡萄糖琼脂(Pda)培养基制备方法操作流程步骤

步骤⑴洗净去皮

洗净去皮马铃薯二百克，葡萄糖二十克，琼脂十四至二十克。

步骤⑵加水煮烂

将马铃薯用刀切割成小块，放进锅中，增添1000毫升水，烧开二十至三十分钟左右，能被玻璃棒捅破就可以了。

步骤⑶过滤残渣

用八层纱布过滤马铃薯渣。

步骤⑷增添琼脂

加热后依据据具体实验操作复需要加十四至二十克琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂充分均匀溶解完。

步骤⑸定容一千毫升

增添葡萄糖二十克，搅拌均匀，待所有葡萄糖充分均匀溶解后，稍冷却后添加适量的水，填补加热操作过程中流失的水分，并将体积设定为一千毫升。

步骤⑹分开包装细节

按照各种不同的实验操作目的，中海制备PDA培养基可以分开包装在试管或三角瓶中。在分开包装操作过程中，需要留意不能污染PDA培养基瓶口，以防打湿棉条导致污染。假如不使用棉塞，还可以用橡胶塞或专用的金属塑料试管帽。为了更好地让空气随意出入，胶塞不可过紧，消毒灭菌前要在喷嘴处夹住一条棉纱线。分开包装后，在管口或瓶口处放一个棉塞。棉塞应由未脱脂的弹性棉制成。棉塞可以过滤空气，预防细菌病毒侵入，缓减马铃薯葡萄糖琼脂培养基(pda)中水的挥发，从而被普遍使用于植物病理学研究。

步骤⑺试管标注

封堵后，用细绳将试管扎好，然后在棉塞上包裹一层牛皮纸，预防消毒灭菌时冷凝水打湿棉塞，再用细绳扎好。用标记笔标注马铃薯葡萄糖琼脂培养基的名称/制备日期/组和生产商。

步骤⑻消毒灭菌

马铃薯葡萄糖琼脂培养基在0.103兆帕、121度的高压蒸汽下消毒灭菌二十分钟左右，冷却后贮藏备用。

常见马铃薯葡萄糖琼脂(pda)培养基注意事项:

①消毒灭菌后，中海PDA培养基务必在三十七度恒温培养箱中培育一天，无菌生长者方可使用。

②PDA培养基通常不用调控ph酸碱度，但对于需要调控ph酸碱度的中.海培养基，通常用ph试纸来测量其酸碱度，如果马铃薯培养基是偏酸性或碱性的，可以用氢氧化钠或盐酸溶液调控。调控时应逐滴添加氢氧化钠或盐酸溶液，以避免局部过酸或过碱毁坏培养基成份。

③大家在使用时也可制成没有琼脂的液体培养基，用来做真菌的摇瓶培养。

④马铃薯葡萄糖琼脂培养基中'海还能够添加氯霉素或土霉素，添加量为0.2克/升培养基，主要是抑制细菌病毒的生长发育降低影响。

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