培养基配制的注意事项,步骤及原则 | 培养基的配制和灭菌方法

培养基的配制步骤和注意事项如下：

步骤：

1. 按培养基的配方称取各种药品。
2. 将各种药品加水溶解，通常是加所需水量的一半。
3. 若配固体培养基，按2%的用量称取琼脂，用水将琼脂浸湿一下，用手挤去琼脂中过多的水分，加入2的溶液中。
4. 加热至琼脂全部溶解，并补足所需的全部水量。
5. 用1mol NaOH和1mol HCl调节pH至要求值。
6. 用分装器将培养基分装入试管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎，灭菌后备用。

注意事项：

1. 加热熔化琼脂时，要不断搅拌，以防糊底。
2. 分装时不要让培养基沾染试管口或瓶口，以防培养过程中容易污染杂菌。

培养基的配制原则包括：

1. 营养成分的配比：碳源和氮源的比例（C/N）要适当。
2. 适宜的酸碱度（pH值）：配制培养基时pH的调节。
3. 渗透压：营养物质要有适合的浓度。
4. 培养基不能反复高温灭菌。
5. 称不溶性固形物时，应单独称，若量少的可以与无机盐一起称，但一定要混匀再分装。
6. 一般情况下培养基用自来水配制。

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