禽流感(H9 亚型)血凝抑制试验阳性血清使用说明书
日期:2023-12-05 | 中海生物技术文库 | 浏览:808 次
【兽药名称】
通用名称:禽流感(H9 亚型)血凝抑制试验阳性血清
商品名称:无
英文名称:Avian Influenza Virus (H9 subtype) positive
Serum of Blood Hemagglutination Inhibition Test
汉语拼音:Qiuliugan(H9yaxing)Xueningyizhishiyan
Yangxingxueqing
【【主要成分与含量】本品系用禽流感病毒(H9 亚型)感染 SPF
鸡制备,效价≥1:128(即 27)
【性状】微黄色或淡红色澄清液体,久置后有少量沉淀。
【作用与用途】用于禽流感(H9 亚型)病毒血凝抑制(HI)试
验阳性对照
【用法与判定】
1 材料
移液器及吸头、1/15mol/L PBS(pH 值 7.0-7.2)、96 孔微量血凝
板(V 型)、1%(V/V)鸡红细胞悬液、加样槽等。
2 试验操作
2.1 血凝试验(HA)
96 孔微量血凝板 1-12 孔加入 PBS 0.025ml,取禽流感(H9)血
凝抑制试验抗原 0.025ml 加入第 1 孔中,反复稀释 5~10 次混匀,从第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔,稀释混匀取 0.025ml 加入第 3 孔,
依此倍比稀释至第 11 孔。每孔加入 PBS 0.025ml,再加入 1%(V/V)
鸡红细胞悬液 0.025ml。第 12 孔为红细胞对照孔。将血凝板震荡混匀,
室温放置 15~40 分钟。
2.2 配制 4 个血凝单位抗原(4HAU)
依据血凝效价,配制 4 个血凝单位抗原(4HAU)。举例:血凝效
价为 1:128,即 128/4=32(即稀释倍数为 1:32)。取 PBS 9.0ml,加入抗
原 1.0ml,(即成 1:10 稀释)震荡混匀取 1.0ml,加入 2.2ml PBS 中,
使最终浓度为 1:32。对其血凝价进行回归检验后,2~8℃存放待用。
2.3 血凝抑制试验(HI)
96 孔微量血凝板 1-11 孔加入 PBS 0.025ml,第 12 孔加入 PBS
0.05ml,取本品 0.025ml 加入第 1 孔中,反复稀释 5~10 次混匀,从
第 1 孔中取 0.025ml 加入第 2 孔,稀释混匀取 0.025ml 加入第 3 孔,
依此倍比稀释至第 10 孔。取 4HAU 于 1-11 孔每孔加入 0.025ml,血
凝板震荡混匀,37℃作用 20 分钟。再每孔加入 1%(V/V)鸡红细胞
悬液 0.025ml。第 11 孔为 4HAU 对照孔,第 12 孔为红细胞对照孔。
将血凝板震荡混匀,室温放置 15~40 分钟。
2.4 结果判定 将血凝板倾斜 60 度,若 4HAU 对照孔无红细胞凝
集,红细胞对照孔有红细胞凝集,且呈明显流淌的泪滴状时,试验成
立,可判读结果。使红细胞凝集被完全抑制的血清最高稀释度,判为
血清 HI 效价。
【注意事项】1.本品避免反复冻融使用。
2.倍比稀释时,吸液、吐液动作不应过快,防止污染其他孔及取
量不准确。
3.4HAU 应现用现配,使用时充分混匀。
4.使用 1%鸡红细胞悬液时,应轻摇混匀。
5.因环境温度不同,判定结果时,可依据对照孔情况,适当调整
作用时间。
6.设立阴、阳性血清对照,且当阴性对照血清 HI 效价≤1:4、阳性
对照血清 HI 效价与已知结果相比,误差≤1 个滴度时,试验方可成立。
【规格】 2ml/瓶
【贮藏与有效期】 -15℃以下保存,有效期为 12 个月
【包装】 10 瓶/盒
供兽医诊断使用
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