三糖铁琼脂培养基TSI检测原理结果操作方法技术应用问题

三糖铁琼脂培养基TSI检测原理结果操作方法技术应用问题

㈠三糖铁琼脂培养基检验检测基本原理

三糖铁琼脂培养基（TSI）用来技术鉴定肠道细菌进行发酵蔗糖/乳糖/葡萄糖并形成硫化氢的生化反应。蛋白胨和牛肉浸出粉提供了氮源/维生素和矿物质；乳糖/葡萄糖和蔗糖是可进行发酵的糖。当它们形成产出酸时，用酚红指示剂测定方法，酸度为黄色，而碱度为红色。硫代硫酸钠能够被某些细菌转变成硫化氢，与硫酸亚铁中的铁盐形成黑色硫化铁。保持氯化钠的稳定平衡渗透压；它是琼脂培养基的凝固剂。

⑴TSI三糖铁琼脂培养基试管的三糖为葡萄糖/乳糖/蔗糖，葡萄糖的含量仅为乳糖或蔗糖的十分之一。当细菌病毒分解掉糖原类时，产酸会减少酸碱值，斜面和底层会有些发黄:

①要是细菌病毒只分解掉葡萄糖而不分解掉乳糖和蔗糖，中海生物考虑到葡萄糖的含量低，形成的少量酸与空气接触到会被氧化，在细菌病毒生长发育繁衍操作过程中会借助含氮物质转化成碱性化合物实现中和，使斜面重新变红；考虑到底层仍处于缺氧状态，细菌病毒分解掉葡萄糖形成的酸暂时性不被氧化，始终保持黄色。

②要是细菌病毒能分解掉葡萄糖、乳糖和蔗糖，形成大量的酸，则斜面和底层为黄色。

③要是细菌病毒没办法进行发酵糖，斜面和底层也不会变色，反倒是会变红。

⑵细菌病毒分解掉葡萄糖、乳糖或蔗糖，一起形成酸和气体，试管便会产生故障问题。

⑶细菌病毒形成的硫化氢会与培养基中的硫酸亚铁产生反应，形成黑色硫化铁，生成黑色范围。

㈡TSI培养基检验结果显示判定

中海三糖铁琼脂培养基TSI检验结果有以下四种显示状态:

⑴斜面红色/底层红色：葡萄糖/乳糖和蔗糖没办法进行发酵，它是非发酵菌的基本特征（铜绿假单胞菌）。

⑵斜面红色/底层黄色：进行发酵葡萄糖而不是乳糖/蔗糖是非进行发酵乳糖细菌病毒的基本特征（志贺氏菌）。

⑶斜面红色/底层黄色，部分范围黑色：葡萄糖进行发酵但乳糖和蔗糖不进行发酵，一起形成硫化氢，它是形成硫化氢和无乳糖细菌病毒的基本特征（沙门氏菌\亚利桑那菌\柠檬酸杆菌\变形杆菌）

⑷斜面黄色/底层黄色：进行发酵葡萄糖、乳糖和蔗糖是乳糖进行发酵大肠菌群的基本特征(大肠杆菌、克雷伯氏菌和肠杆菌)

㈢三糖铁琼脂培养基使用操作方法

称量本产品六十四点五克，进行加热溶化于一千毫升蒸馏水中，烧开一分钟左右，装进十六毫米乘一百五十毫米的试管中，在一百二十一摄氏度高压灭菌消毒十五分钟左右，制造而成高层斜面。

㈣TSI培养基技术应用

重点做为鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及灭活疫苗研发。为预防鸡白痢沙门氏菌病，中海生物从疫源地分离鉴定的鸡白痢沙门氏菌强毒株被研发成油乳剂灭活疫苗和蜂胶灭活疫苗。

㈤三糖铁琼脂培养基需注意的问题

查验形成硫化氢的异常细菌病毒时，应立即观测检验结果显示，避免转化成的硫化铁形成黑色范围，盖坡和底层的颜色会直接影响对检验结果显示的判定。

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