斜面/液体/半固体培养基移种方法

本文归纳斜面培养基移种方法,液体培养基移种方法,半固体培养基移种方法。

A、斜面培养基移种技术

㈠材料

琼脂斜面培养基；经分离培养的平板培养物。

㈡方法

①在琼脂斜面培养基试管上部注明移植菌名称或编号/接种日期/接种者组别及编号。

②左手握住装有细菌的平板底部，右手握住接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后，蘸取平板线上发育良好的隔离菌落。将平板放回原位，马上用这只手拿起斜面培养基斜握。用右手小指和手掌握住卫生棉条，轻轻旋转，然后拔出卫生棉条，用火焰对喷嘴进行消毒。

㈢将接种环伸入斜面培养基管底部的固化水中，沿斜面培养基表面自下而上画一条直线，再自下而上画一条连续的折线；不要画直线，就画曲折线。取出接种环，用火焰消毒喷嘴，塞上棉塞，放在试管架上，火焰消毒后放下。

如果移植到斜面培养基上的细菌在斜面培养基上或液体培养基中生长，中海生物技术人员用左手斜握菌种管和斜面培养基管，同时用右手无名指和小指掌拉起并夹住两个棉条。对喷嘴接种环进行火焰灭菌，从菌种管中取出的细菌立即移植到斜面上，塞好棉塞，火焰灭菌后放下接种环。然后，斜面培养基在37℃培养箱中培养二十四小时。结果斜面上形成菌苔。

B、液体培养基移种技术

用于富集纯菌，观察液体环境中细菌的生长特征:混浊生长、表面生长或沉淀生长。

㈠材料

肉汤培养基；斜面培养物(大肠埃希菌、化脓性链球菌、枯草芽胞杆菌)

㈡方法

①取接种环，在火焰上灼烧灭菌，冷却。

②双管移植法左手持细菌斜面培养和肉汤培养基两个试管，右手持接种环，按无菌操作办法取少量细菌。在靠近液面的倾斜管壁上轻轻涂抹、研磨接种环，试管直立，使管壁上附着的细菌浸入液体中。接种后，放入37℃培养箱中培养。

㈢结果

①混浊生长大肠杆菌溶液呈均匀混浊，管底有少量沉淀。

②化脓性链球菌菌液管底有沉淀，菌液无明显混浊。

③菌膜生长:枯草芽孢杆菌液体表面形成一层膜。

C、半固体培养基移种技术

用于保存细菌和间接检查细菌是否有能力。

㈠材料

半固体培养基；细菌斜面培养物。

㈡方法

①接种针经火焰灭菌冷却后，斜面培养表面有细菌染色。

②无菌法穿刺接种，将接种针插入半固体培养基中央，在距管底0.5cm处停止，然后按原路线退出。穿刺拔出时注意防止接种针在穿刺线外摆动。

③用火焰消毒试管口，并用棉塞塞住。接种用针焰灭菌。培养物在37℃培养箱中培养。

㈢结果

有动力的细菌扩散，而无动力的细菌沿穿刺线生长。

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